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Western组织细胞蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，主要用于Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。

• 细胞裂解
  
  • 取5～10×10⁶个细胞，在4℃，1000rpm条件离心5～10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
    
  • 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
    
  • 每5×10⁶个细胞中加入500μL冷的裂解液（每10⁶个细胞加100μL非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μL～150μL，或一个75cm2培养瓶加1～2mL。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15～20分钟。
    
  • 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
    
  • 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
• 组织裂解
  
  • 取100mg组织样本剪碎，加入1mL裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
    
  • 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
    
  • 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
    上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。